云南撒坝猪致病性大肠埃希菌外膜蛋白F(OmpF)缺失株的构建

作     者：吴程华 崔艳艳 高洪 严玉霖 赵汝 

作者机构：云南农业大学动物科学技术学院云南昆明650201 

基　　金：国家自然科学基金(项目批准号:31260594) 云南省高校科技创新团队支持计划资助(云教科〔2011〕14号) 云南省现代农业生猪产业技术体系建设(云财农〔2009〕171号) 

出 版 物：《上海畜牧兽医通讯》 (Shanghai Journal of Animal Husbandry and Veterinary Medicine)

年 卷 期：2015年第4期

页      码：22-25页

摘      要：为了进一步评价*** OmpF的功能,我们构建了***外膜蛋白F的缺失突变株。首先根据*** F-M-2的测序后的OmpF基因序列设计PCR敲除引物,引物5’端分别有50bp和48bp的拟敲除基因的同源臂,3’端为扩增引物,以pKD3为模板,扩增两侧含FRT位点的氯霉素抗性基因,然后利用pKD46的λ-Red重组系统替换*** F-M-2基因组上的OmpF基因,再利用表达FLP重组酶的质粒pCP20将FRT位点之间的氯霉素抗性基因删除,最后用鉴定引物进行鉴定并测序。结果成功地构建了云南撒坝猪致病性*** OmpF缺失突变株。

主 题 词：外膜蛋白F 撒坝猪致病性大肠埃希菌 λ-Red重组系统 基因敲除 聚丙烯酰胺凝胶电泳 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.14170/j.cnki.cn31-1278/s.2015.04.006

馆 藏 号：203526684...