重组小鼠凝血因子Ⅶ-pPIC9K表达载体的构建及其在毕赤酵母中的表达

作     者：杨峥嵘 何飞 王蒙 粟永萍 程天民 YANG Zheng-rong;HE Fei;WANG Meng;SHU Yong-ping;CHENG Tian-ming

作者机构：第三军医大学预防医学院全军复合伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038 第三军医大学新桥医院口腔科重庆400038 

基　　金：重庆市院士基金(NO.6317) 

出 版 物：《中国肿瘤生物治疗杂志》 (Chinese Journal of Cancer Biotherapy)

年 卷 期：2005年第12卷第2期

页      码：98-102页

摘      要：目的:构建去除凝血功能,但保留TF亲和力的rmFⅦ-pPIC9K表达载体并用毕赤酵母表达目的蛋白。方法:通过RT-PCR自小鼠肝脏获得FⅦcDNA,对其进行定点突变后连入pPIC9K质粒,电击转化Gs115酵母细胞,经G418筛选、BMGY/BMMY小量摇瓶培养表达目的蛋白,并进行初步的凝血、结合活性鉴定。结果:成功构建了3种rmFⅦ-pPIC9K表达载体(M1:LCmFⅦ-pHC9K;M2:K341AmFⅦ-pPIC9K;M3:QEAmFⅦ-pPIC9K),并通过酵母表达获得相应蛋白,经初步活性鉴定其中两种符合设计目的。结论:毕赤酵母表达rmFⅦ蛋白,为抗肿瘤血管药物的研究、肿瘤的分子靶向性治疗奠定了基础。

主 题 词：凝血因子Ⅶ 组织因子 毕赤酵母 定点突变 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3872/j.issn.1007-385X.2005.02.004

馆 藏 号：203527614...