H1亚型猪流感病毒HA基因密码子优化的DNA疫苗免疫保护效力研究

作     者：杨馥如 于海 王斌 黄梦 马继红 周艳君 童光志 

作者机构：中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 

基　　金：国家科技支撑计划重点项目"动物源性人兽共患病安全高效疫苗研制与开发"(2010BAD04B03) 国家国际科技合作项目(2010DFB33920) 中央级公益性科研院所基本科研业务费项目(2010JB01) 上海市科委基础研究重点项目(10JC1417300) 

出 版 物：《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)

年 卷 期：2011年第19卷第4期

页      码：13-19页

摘      要：DNA疫苗的免疫效果与抗原基因的表达量及表达抗原的免疫原性有直接关系。为了提高猪流感病毒（Swine influenza virus，SIV）HA基因DNA疫苗的表达量，增强其免疫效果，本研究通过人工合成的方法将H1亚型猪流感病毒A／Swine／Guangdong／1／01（H1N1）的HA基因密码子优化为猪体内偏嗜性密码子optiHA，同野生型A／Swine／Guangdong／1／01（H1N1）的HA基因分别与真核表达载体PCAGGS连接构成重组质粒PCAGGS—optiHA和PCAGGS—HA，然后分别转染293T细胞，48h后采用间接免疫荧光的方法检测Ⅲ基因的瞬时表达蛋白情况。将质粒PCAGGS—HA、PCAGGS—optiHA以100μg／只的剂量，采用后腿肌肉多点注射的方式，免疫6-8周龄雌性BALB／c小鼠，同时设立空载体PCAGGS对照。共免疫3次，每次间隔2周，三免2周后对每组以10^3.87 EID50的A／Swine／Guangdong／1／01（H1N1）进行攻毒。采用ELISA、血凝抑制试验、细胞因子检测和肺组织病毒含量测定等实验评价这两种DNA疫苗的免疫效果。结果表明，HA基因密码子优化的DNA疫苗可显著提高体液免疫和细胞免疫的应答水平，攻毒后免疫组PCAGGS—optiHA的保护效力明显高于免疫组PCAGGS—HA。这一结果为进一步研究和设计有效的SIVDNA疫苗奠定了基础。

主 题 词：猪流感病毒 H1亚型 HA基因 密码子优化 DNA疫苗 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 090601[090601] 07[理学] 09[农学] 0906[农学-水产类] 071007[071007] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1674-6422.2011.04.003

馆 藏 号：203527664...