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DNA芯片检测泌尿生殖道病原体及耐药的研究

DNA芯片检测泌尿生殖道病原体及耐药的研究

作     者:周文明 赵建龙 杨森 曹慧敏 李伟 沈玉君 张书梅 杜文辉 张学军 

作者机构:安徽医科大学皮肤性病研究所第一附属医院皮肤性病科合肥230022 中国科学院上海微系统与信息技术研究所 

出 版 物:《中华皮肤科杂志》 (Chinese Journal of Dermatology)

年 卷 期:2005年第38卷第2期

页      码:108-111页

摘      要:目的研制一种DNA芯片,结合多重PCR方法快速检测泌尿生殖道炎症3种病原体及其耐药类型。方法根据泌尿生殖道病原体淋球菌、沙眼衣原体和解脲脲原体的基因保守序列设计引物和探针,分别检测3种病原体;根据淋球菌gyrA、parC和16srRNA基因序列突变位点设计引物和探针,分别检测淋球菌对喹诺酮类药物和大观霉素的耐药性;根据淋球菌和解脲脲原体的共同tetM基因序列设计引物和探针,检测对四环素的耐药性。制备芯片,对152份泌尿生殖道拭子提取DNA进行7重PCR扩增,并且Cy5荧光标记包含上述基因序列的目的DNA片段,与固定在芯片上的探针杂交,芯片信号分析系统Scanarray4000在635nm处扫描并分析结果,并与临床检查结果比较。结果DNA芯片敏感性是0.01fg质粒DNA。152份泌尿生殖道炎症拭子其病原体种类及其耐药类型全部可用DNA芯片检测出来,与目前临床检查结果有较好的一致性(K>0.8)。结论研制的DNA芯片结合7重PCR方法快速检测泌尿生殖道淋球菌、沙眼衣原体和解脲脲原体3种病原体及其对喹诺酮类药物、大观霉素和四环素的耐药类型,具有快速、高特异性和高灵敏度,可以应用于临床检测。

主 题 词:病原体 泌尿生殖道炎症 耐药 淋球菌 DNA芯片 解脲脲原体 沙眼衣原体 探针 DNA片段 质粒DNA 

学科分类:1010[医学-医学技术类] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3760/j.issn:0412-4030.2005.02.014

馆 藏 号:203531596...

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