烟曲霉菌壳聚糖酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

作     者：梁东春 左爱军 郭刚 张镜宇 LIANG Dong-chun;ZUO Ai-jun;GUO Gang;ZHANG Jing-yu

作者机构：天津市内分泌研究所天津300070 

基　　金：国家自然科学基金重点资助项目(50233020)~~ 

出 版 物：《微生物学报》 (Acta Microbiologica Sinica)

年 卷 期：2005年第45卷第4期

页      码：539-542页

摘      要：根据GenBank中发布的烟曲霉菌壳聚糖酶(Aspergillusfumigatuschitosanase,EC3.2.1.132)基因序列人工合成8条DNA长链及4条引物链。DNA链的设计上在不改变壳聚糖酶氨基酸组成的前提下选择大肠杆菌使用频率高的密码子。PCR拼接法扩增壳聚糖酶基因并克隆入pGEM-Teasy载体进行序列分析,进一步亚克隆入表达载体pGEX-3X。重组质粒pGEX-Csn转化***5α,IPTG诱导表达,亲和层析及FactorXa酶解纯化重组Csn。所得重组壳聚糖酶具有降解壳聚糖的生物活性,其活性受温度及pH值的影响。

主 题 词：壳聚糖酶基因,克隆,表达 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:0001-6209.2005.04.011

馆 藏 号：203531833...