鸡CaBP-D28k基因重组质粒构建

作     者：俞路 王雅倩 章世元 李燕舞 李治学 YU Lu;WANG Ya-qian;ZHANG Shi-yuan;LI Yan-wu;LI Zhi-xue

作者机构：扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009 

基　　金：扬州大学博士科研启动基金资助项目[扬大人(2006)31号] 

出 版 物：《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 (Journal of Zhejiang University:Agriculture and Life Sciences)

年 卷 期：2008年第34卷第6期

页      码：608-614页

摘      要：为构建pCEP4-CaBP-D28k真核表达载体,根据GenBank已发表钙结合蛋白D28k(calbindin-D28 k,CaBP-D28 k)设计1对引物,利用RT-PCR方法获得新扬州鸡CaBP-D28 k基因序列,克隆入真核表达载体pCEP4,经PEI介导转入非洲绿猴转化肾细胞(COS-1)中,并以间接免疫荧光试验(IFA)检测CaBP-D28 k表达状况.结果表明,CaBP-D28 k基因核苷酸长度为789 bp,编码261个氨基酸,与GenBank上已发表序列比较,核苷酸同源性为99.9%,在第760位处存在G→T的错义突变.该序列与蟾蜍、鼠、人CaBP-D28k氨基酸同源性分别为79.7%、78.2%、78.6%;酶切和测序鉴定证实pCEP4-CaBP-D28k含有目的片段,且连接构建正确;在COS-1细胞中检测到CaBP-D28 k表达.这为进一步研究pCEP4-CaBP-D28k在动物体中的表达,调控机体钙代谢奠定了基础.

主 题 词：鸡 CaBPD28k 基因克隆 表达载体 间接免疫荧光 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 0905[农学-林学类] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 090501[090501] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.3785/j.issn.1008-9209.2008.06.005

馆 藏 号：203532858...