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优化蕺菜属ITS-PCR扩增条件的研究

优化蕺菜属ITS-PCR扩增条件的研究

作     者:赵欢 吴卫 郑有良 ZHAO Huan;WU Wei;ZHENG You-liang

作者机构:西华师范大学生命科学学院四川南充637002 四川农业大学农学院四川雅安625014 

基  金:四川省教育厅重点资助项目(2003A011) 教育部留学回国人员科研启动基金项目资助 

出 版 物:《生物技术》 (Biotechnology)

年 卷 期:2009年第19卷第2期

页      码:40-44页

摘      要:目的:建立蕺菜rDNA ITS扩增反应的优化体系。方法:以蕺菜DNA为模板,采用单因素试验设计,对影响蕺菜rDNAITS区扩增的重要参数进行了优化试验。结果:最优蕺菜ITS-PCR的反应体系为25μl反应体系中含Taq酶0.75U、Mg2+2.5mmol/L、dNTP0.15mmol/L、引物对0.6μmol/L、模板DNA10ng。扩增程序为在94℃下预变性4min,然后进行36个循环(94℃变性45s,60℃退火50s,72℃延伸90s),最后在72℃延伸8min。结论:这一体系的建立为利用蕺菜rDNAITS区研究蕺菜种质资源的系统进化提供了标准化程序。

主 题 词:蕺菜 PCR反应体系 rDNA ITS 影响因子 优化 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D O I:10.16519/j.cnki.1004-311x.2009.02.031

馆 藏 号:203533146...

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