膜反向斑点杂交法检测广东人G6PD基因6种常见突变

作     者：郑卫东 张太松 陈冬 葛艳芬 林婷 胡斌 ZHENG Wei-dong;ZHANG Tai-song;CHEN Dong;GE Yan-fen;LIN Ting;HU bin

作者机构：广东省人民医院 广东省医学科学院病理医学部检验科 中山大学达安基因诊断中心广东广州510080 

基　　金：广东省医学科学研究基金(A2009040) 

出 版 物：《中山大学学报（医学科学版）》 (Journal of Sun Yat-Sen University:Medical Sciences)

年 卷 期：2011年第32卷第4期

页      码：463-466页

摘      要：【目的】探讨膜反向斑点杂交法在广东人G6PD基因6种常见突变同步检测中的应用。【方法】用高铁血红蛋白还原试验和G6PD/6-PGD酶活性比值法进行G6PD缺乏症筛查。应用多重PCR方法扩增G6PD基因目的片段。用Premier Primer6.0软件设计和优化针对广东人常见6种G6PD基因突变型的特异性寡核甘酸探针,用乙基-3-二甲氨基丙碳二亚胺(EDC)法处理尼龙膜并固定探针,制成G6PD基因突变检测用膜条。多重PCR扩增产物与固定在膜条上寡核苷酸探针进行杂交,通过显色反应判读结果。以G6PD基因测序为金标准,对膜反向斑点杂交法进行评价。【结果】26例标本中膜反向斑点杂交法检测结果:95A→G突变型5例,1024C→T突变型3例,1376G→T突变型8例,1388G→A突变型7例,392G→T突变型1例,未发现1311C→T突变型,有两例检测为阴性。膜反向斑点杂交法未能测出的2例标本经基因测序证实存在392G→T突变,其余24例膜反向斑点法与基因测序法的结果完全一致,符合率为92.3%(24/26)。【结论】在优化探针设计和杂交条件前提下,膜反向斑点杂交法可用于广东人G6PD基因6种常见突变型的同步检测。

主 题 词：葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 基因突变 反向斑点杂交法(RDB) 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100201[100201] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2011.0084

馆 藏 号：203534136...