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siRNA XIAP表达载体的构建及其生物学作用

siRNA XIAP表达载体的构建及其生物学作用

作     者:黄维亮 谢元林 陈军 苏先狮 HUANG Wei-liang;XIE Yuan-lin;CHEN Jun;SU Xian-shi

作者机构:长沙市第一医院检验科长沙410011 中南大学湘雅二医院传染科 

基  金:湖南省卫生厅科研基金资助(B2010-100) 

出 版 物:《中国医师杂志》 (Journal of Chinese Physician)

年 卷 期:2012年第14卷第7期

页      码:898-900页

摘      要:目的构建靶XIAP的siRNA表达载体,研究其对Hep3B细胞中XIAP表达的影响。方法根据siRNA设计原则,设计并合成三段XIAP的siRNA序列,克隆到pRNAT—U6.1/Neo质粒构建重组质粒;经序列分析确认质粒构建成功后,将重组质粒转染入人肝癌细胞Hep3B,通过***、Westernblot和免疫组化分析X!AP的表达。结果重组质粒pRNAT—u6.1/***经过基因序列分析,siRNA片段成功插入,转染不同siRNAXIAP质粒均可使XIAP的翻译和蛋白表达水平不同程度的降低。结论成功构建并筛选出靶向XIAP基因的siRNA表达载体,为进一步研究XIAP在调控肝癌细胞凋亡方面的作用奠定了基础。

主 题 词:X连锁凋亡抑制蛋白质/遗传学 RNA 小分子干扰 质粒 遗传载体 

学科分类:1001[医学-基础医学] 10[医学] 

D O I:10.3760/cma.j.issn.1008-1372.2012.07.011

馆 藏 号:203534642...

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