停乳链球菌ISP基因的克隆与表达及其免疫原性研究

作     者：李月颖 朱松 剧慧栋 刘文青 赵宝华 裴艳涛 LI Yueying;ZHU Song;JU Huidong;LIU Wenqing;ZHAO Baohua;PEI Yantao

作者机构：河北师范大学生命科学学院河北石家庄050024 

基　　金：河北省重大科技攻关项目(11230405D) 河北省高等学校科学技术研究项目(QN2014199) 

出 版 物：《河北师范大学学报（自然科学版）》 (Journal of Hebei Normal University：Natural Science)

年 卷 期：2015年第39卷第2期

页      码：158-164页

摘      要：根据GenBank报道的停乳链球菌免疫分泌蛋白基因(immunogenic secreted protein,ISP)序列设计引物,PCR扩增得到1 550bp的isp片段,其基因序列与GenBank提交序列的同源性为98.13%.将isp基因与表达载体pET-25b(+)连接,成功构建重组质粒pET-25b(+)-isp.转化大肠杆菌BL21(DE3),成功得到阳性表达重组菌株BL21(pET-25b(+)-isp).经IPTG诱导后,SDS-PAGE与Western blot检测得到约55ku的目的蛋白.经优化确定,isp蛋白的最优表达条件:1mmol/L IPTG,37℃诱导18h,且此时表达的蛋白具有良好的抗原性.该研究制备了奶牛乳房炎停乳链球菌的基因工程疫苗,并对其免疫原性进行了探究,为奶牛乳房炎的免疫防治奠定了基础.

主 题 词：奶牛乳房炎 停乳链球菌 isp基因 基因工程疫苗 免疫原性 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.13763/j.cnki.jhebnu.nse.2015.02.012

馆 藏 号：203535887...