捻转血矛线虫HSP60原核表达及特性分析
作者机构：南京农业大学动物医学院江苏南京210095
基 金：国家973基础研究计划(2015CB150300) 中央高校基本科研业务费自主创新重点项目(KYZ201315)
出 版 物：《畜牧与兽医》 (Animal Husbandry & Veterinary Medicine)
年 卷 期：2015年第47卷第11期
页 码：76-80页
摘 要：根据Gen Bank公布的捻转血矛线虫热休克蛋白60(HSP60)基因序列,设计一对特异性引物,以捻转血矛线虫总RNA为模板,通过RTPCR技术扩增出一条约为1 700 bp的DNA片段,将该片段克隆到p MD19-T载体上进行序列分析,结果显示该片段长1 710 bp,编码569个氨基酸。将该基因片段亚克隆到p ET32a(+)载体上,转化大肠杆菌BL21,用IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE显示,该基因成功表达,其融合蛋白分子量为80.7 ku,主要分布于菌体上清中。Western blot结果显示该重组蛋白可被人工感染捻转血矛线虫山羊血清所识别。Real-time PCR分析显示,HSP60基因在第三期幼虫和活化第三期幼虫中的相对表达量分别为1.0和0.88。本文探讨捻转血矛线虫HSP60功能奠定了基础。
主 题 词：捻转血矛线虫 热休克蛋白60 抗原特性 基因差异性表达
学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类]
馆 藏 号：203536176...
