番茄miRNA的茎环qRT-PCR方法验证

作     者：祁心 杨瑞 赵福宽 王建立 王绍辉 程继鸿 Qi Xin;Yang Rui;Zhao Fukuan;Wang Jianli;Wang Shaohui;Cheng Jihong

作者机构：北京农学院植物科学技术学院北京市农业新技术重点实验室生物科学与工程学院北京102206 

基　　金：长城学者(CIT&TCD20130323) 国家自然科学基金项目(31171952) 北京市重大科技计划项目(D131100000713-001) 国家星火计划项目(2012GA600002)共同资助 

出 版 物：《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)

年 卷 期：2015年第13卷第8期

页      码：1867-1871页

摘      要：本研究采用SYBR Green染料的茎环q RT-PCR方法,以mi R159和mi R172为例,利用番茄叶片的总RNA作为模板,设计mi RNA的茎环引物、特异上游引物、通用下游引物,使用茎环荧光定量PCR法定量检测mi RNA表达量在番茄中的可行性。通过分析扩增曲线、熔解曲线,制作标准曲线,以及对PCR产物的克隆测序,结果表明该方法可以用于番茄mi RNA的定量检测,并且具敏感性高、特异性好、操作简单、节约成本、模板用量少的优点。Trizol法和试剂盒法提取的总RNA在后续实验中几乎没有差异,但Trizol法更为经济,有效率。Mi RNAs在植物的生长发育过程中起着重要的作用,本研究为番茄mi RNA的深入研究奠定了基础。

主 题 词：miRNA 茎环qRT-PCR 定量检测 番茄 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.13271/j.mpb.013.001867

馆 藏 号：203536521...