大黄鱼肌肉生长抑制素基因原核表达及多克隆抗体的制备

作     者：董海阳 叶秀丽 薛良义 Diallo Amadou DONG Hai-yang;YE Xiu-li;XUE Liang-yi;Diallo Amadou

作者机构：宁波大学生命科学与生物工程学院浙江宁波315211 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30871916) 国家863计划资助项目(2006AA10A405) 

出 版 物：《台湾海峡》 (Journal of Oceanography In Taiwan Strait)

年 卷 期：2011年第30卷第2期

页      码：196-202页

摘      要：肌肉生长抑制素抑制动物肌肉的生长发育.根据本实验室克隆的大黄鱼(Pseudosciaena cro-cea)肌肉生长抑制素(MSTN)基因编码序列设计引物,用RT-PCR扩增目的片段,构建MSTN-pET-28 a重组表达质粒,将其转化到大肠杆菌BL21上并用1.0 mmol/dm3IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳检测该目的蛋白大小约为44 kDa,与理论值大小符合.用0.25 mol/dm3KCl染色后从凝胶中切取该蛋白且回收.该回收蛋白与弗氏佐剂等量混合后注射ICR小鼠制备多克隆抗体,并用Westernblot检测该抗体.免疫印迹结果在44 kDa的位置上出现棕色条带,表明大黄鱼肌肉生长抑制素的多克隆抗体制备成功.这为今后对肌肉生长抑制素功能的研究奠定了基础.

主 题 词：海洋生物学 肌肉生长抑制素 原核表达 多克隆抗体 免疫印迹 大黄鱼 

学科分类：070703[070703] 07[理学] 0707[理学-海洋科学类] 

D　O　I：10.3969/J.ISSN.1000-8160.2011.02.007

馆 藏 号：203542201...