巢式荧光PCR结合高分辨熔链曲线检测结核分枝杆菌及其亚型

作     者：邵雪君 朱宏 黄莉莉 陶云珍 徐俊 何萍 汪健 SHAO Xue-jun;ZHU Hong;HUANG Li-li;TAO Yun-zheng;XU Jun;HE Ping;WANG Jian

作者机构：苏州大学附属儿童医院检验科江苏苏州215003 苏州大学附属儿童医院普外科江苏苏州215003 

基　　金：苏州市科技发展项目(SYS201248) 苏州市科技支撑计划社会发展项目(SS201244) 

出 版 物：《江苏大学学报（医学版）》 (Journal of Jiangsu University：Medicine Edition)

年 卷 期：2015年第25卷第4期

页      码：342-345页

摘      要：目的:建立一种检测结核分枝杆菌及其亚型的PCR方法。方法:根据人型及牛型结核分枝杆菌硝酸还原酶(nitrate reductase,nar GHJI)基因启动子区215位上T-C的转换,设计巢式荧光PCR结合高分辨熔链曲线检测结核分枝杆菌及其亚型,测定其敏感性,并用琼脂糖凝胶电泳验证观察巢式荧光PCR产物的特异性。以人型结核杆菌标准株(H37Ra)、卡介苗培养菌液、人型临床分离株和牛型临床分离株为标本,高分辨熔链曲线分析结核分枝杆菌亚型正态化熔链曲线及熔链温度。结果:巢式荧光PCR特异性地检出结核分枝杆菌nar GHJI基因,其敏感性比荧光定量PCR高10倍左右;人型及牛型结核分枝杆菌nar GHJI基因PCR产物的高分辨熔链曲线分成2个不同组合,熔链温度分别为(83.08±0.08)℃和(83.96±0.09)℃,差异有统计学意义(t=217.23,P<0.05)。结论:成功建立检测结核分枝杆菌及其亚型的巢式荧光PCR结合高分辨熔链曲线法。

主 题 词：结核分枝杆菌 巢式PCR 熔链曲线 亚型 

学科分类：100208[100208] 1002[医学-临床医学类] 10[医学] 

D　O　I：10.13312/j.issn.1671-7783.y150054

馆 藏 号：203543029...