绵羊肺腺瘤病毒的巢式RT-PCR技术检测

作     者：赵泽赟 刘淑英 罗学东 ZHAO Ze-yun;LIU Shu-ying;LUO Xue-dong

作者机构：内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018 呼和浩特市和林格尔县兽医局呼和浩特010012 

基　　金：国家自然科学基金(No.30960271 No.30760178) 内蒙古科技创新引导基金联合资助 

出 版 物：《中国人兽共患病学报》 (Chinese Journal of Zoonoses)

年 卷 期：2011年第27卷第6期

页      码：547-551页

摘      要：目的为能够更加准确、敏感的检测绵羊肺腺瘤病(sheep pulmonary adenomatosis SPA)。方法本试验通过外源性绵羊肺腺瘤病毒的囊膜基因env的TM区和长末端重复序列LTR的U3区分别设计特异性的内外侧引物,运用巢式RT-PCR的方法进行检测,同时与普通RT-PCR进行比较。结果测得的绵羊肺腺瘤病毒的env基因和U3区序列与Gen-Bank中发表的外源性绵羊肺腺瘤病毒基因序列(AF105220)同源性分别为100%和98%。特异性试验结果表明本试验设计的env基因和LTR的U3区的内外侧引物不能从健康绵羊、小鼠、家兔的肺组织以及感染了SPA羊的肾、肝、脾的RNA中扩增出条带。敏感性试验结果表明,env基因和LTR的U3区的巢式RT-PCR诊断方法最低能检测出的标准模板RNA量分别为48 fg和48 pg,而普通的RT-PCR,env基因及LTR的U3区的最低检出量分别为0.48 ng和4.8 ng,得出巢式RT-PCR的敏感性高于普通RT-PCR,同时env基因的敏感性高于LTR的U3区的敏感性。结论以上试验说明巢式RT-PCR技术对于检测绵羊肺腺瘤病具有很高的敏感性和实用性。

主 题 词：绵羊肺腺瘤病 绵羊肺腺瘤病毒 巢式RT-PCR 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1002-2694.2011.06.021

馆 藏 号：203543083...