ULF基因沉默对依托泊苷引起的非小细胞肺癌H1299细胞凋亡的影响

作     者：刘伟 徐鑫 曹晓慈 袁菲 方会英 LIU Wei;XU Xin;CAO Xiao-ci;YUAN Fei;FANG Hui-ying

作者机构：河北中医学院护理学院河北石家庄050000 河北省人民医院急诊科河北石家庄050000 河北省人民医院肿瘤二科河北石家庄050000 山东枣庄职业学院口腔系山东枣庄277000 

出 版 物：《中国生化药物杂志》 (Chinese Journal of Biochemical Pharmaceutics)

年 卷 期：2014年第34卷第4期

页      码：59-62页

摘      要：目的探讨RNA干扰靶向抑制ULF的表达对化疗药物依托泊苷(etoposide)引起的非小细胞肺癌H1299细胞凋亡的影响。方法设计3条针对ULF基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)片段及1条阴性对照siRNA,分别在慢病毒载体介导下感染H1299细胞。用real-time PCR及Western印迹法筛选出1条抑制效率最高的ULF序列,对有效干扰组和对照干扰组细胞进行etoposide处理,干扰对照细胞或沉默ULF的H1299细胞,用c-PARP做标记物检测H1299细胞的凋亡程度,MTT法检测H1299细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期分布。结果经感染ULF-shRNA-1序列的H1299细胞中ULFmRNA及蛋白表达降低最为明显,抑制率达80%,选择该条siRNA作为有效干扰组进行后续实验。Western blot结果显示etoposide处理后,有效干扰组H1299细胞凋亡水平显著增加,细胞增殖抑制率显著高于对照干扰组,并与etoposide剂量呈正相关,2组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。流武结果显示有效干扰组G0/G1期细胞较对照组增加,S期细胞减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 etoposide处理后通过干扰ULF蛋白表达可诱导H1299细胞的凋亡,抑制细胞增殖,使细胞出现S期阻滞,推测ULF基因可能成为癌症基因治疗的一个新靶点。

主 题 词：ULF H1299细胞 肺癌 依托泊苷 

学科分类：0831[工学-公安技术类] 08[工学] 0836[0836] 

馆 藏 号：203546818...