siRNA逆转乳腺癌细胞系MCF-7/ADR耐药

作     者：李臣宾 张峰 史玉荣 魏熙胤 杨毅 牛瑞芳 

作者机构：天津医科大学附属肿瘤医院肿瘤学中心实验室乳腺癌防治教育部重点实验室天津300060 南开大学医学院天津300060 

基　　金：国家自然科学基金项目(No.30370553)~~ 

出 版 物：《癌症》 (Chinese Journal of Cancer)

年 卷 期：2004年第23卷第12期

页      码：1605-1610页

摘      要：背景与目的:肿瘤的多药耐药性常导致乳腺癌化疗失败,多药耐药基因1(multidrugresistance1,mdr1)编码的P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)过度表达是重要的耐药机制。本研究拟探讨siRNA抑制耐药乳腺癌细胞系MCF-7/ADRmdr1基因表达的可行性。方法:选择耐阿霉素人乳腺癌细胞系MCF-7/ADR及其敏感细胞系MCF-7作为研究对象。将预先设计的siRNA包装入质粒载体,然后转化质粒到大肠杆菌中,经过克隆、扩增、纯化后转染到MCF-7/ADR细胞中,潮霉素筛选,流式细胞仪检测P-gp的表达率,实时定量PCR检测mdr1基因的表达率,并对转染后的细胞作阿霉素耐药实验。结果:流式细胞仪检测结果显示,MCF-7/ADR细胞经特异性siRNA作用后,P-gp的表达率由99.8%下降到12.3%。实时相对定量PCR检测结果显示,MCF-7/ADR细胞经特异性siRNA作用后其Ct值由25.22增加到30.64。阿霉素耐药实验显示,转染siRNA的MCF-7/ADR细胞IC50为0.51μmol/L,而未转染组的IC50为17.88μmol/L。结论:siRNA能引发人乳腺癌多耐药细胞系MCF-7/ADR内mdr1基因沉默,从而为siRNA作为一种可能的治疗手段提供了理论依据。

主 题 词：小干扰RNA 短发卡RNA 多药耐药基因 基因沉默 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-467X.2004.12.003

馆 藏 号：203546979...