黄芩苷作用于脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞对神经干细胞分化的影响

作     者：庄朋伟 张艳军 庞坦 Zhuang Peng-wei;Zhang Yan-jun;Pang Tan

作者机构：天津中医药大学中药学院、天津市中药药理学重点实验室天津市300193 

基　　金：国家自然科学基金(30472177)“不同治则中药针对神经再生各阶段进行干预促进功能性神经再生的研究” 天津市科技攻关计划重点科技攻关专项项目(06YFSZSF01600)“中药分别干预移植神经干细胞及骨髓来源内皮祖细胞迁移、分化、成熟的研究” 国家自然科学基金(30873395/C190701)“基于调控神经干细胞对称分裂、不对称分裂模式的中药促进神经再生机制研究” 

出 版 物：《中国组织工程研究与临床康复》 (Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research)

年 卷 期：2009年第13卷第1期

页      码：43-47页

摘      要：背景:实验室前期研究表明黄芩苷可以提高体外培养的神经干细胞分化为神经元的比例。但考虑到体内实验中血脑屏障的存在,黄芩苷能否通过血脑屏障主要细胞成分而发挥诱导神经干细胞定向分化为神经元的能力还不清楚。目的:分别将大鼠脑微血管内皮细胞、星形胶质细胞与神经干细胞共培养,观察在模拟体内复杂微环境条件下,黄芩苷能否定向诱导神经干细胞向神经元分化并促进分化神经元的成熟。设计、时间及地点:细胞水平的体外对照观察,于2007-09/2008-03在天津中医药大学中医药研究院中药药理学重点实验室和南开大学医学院完成。材料:取孕14dSD大鼠,用以分离培养神经干细胞。方法:利用Transwell装置,分别将脑微血管内皮细胞、星形胶质细胞和神经干细胞共培养。用含有10μmol/L黄芩苷的培养基作用7d,并设置空白对照组。以β-tubulinⅢ标记未成熟神经元,MAP-2标记成熟神经元,胶质纤维酸性蛋白标记星形胶质细胞。主要观察指标:应用细胞免疫荧光化学染色检测神经干细胞分化后β-tubulinⅢ、MAP-2和胶质纤维酸性蛋白阳性细胞比例,以实时荧光定量反转录-聚合酶链反应技术检测黄芩苷对脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞血管内皮细胞生长因子、神经生长因子和血小板衍生生长因子mRNA表达的影响。结果:与脑微血管内皮细胞共培养条件下,与空白对照组比较,黄芩苷可显著增加β-tubulinⅢ阳性细胞比例(P0.05)。与脑微血管内皮细胞、星形胶质细胞共培养条件下,与空白对照组比较,黄芩苷可显著增加MAP-2阳性细胞比例(P<0.01)。黄芩苷作用于脑微血管内皮细胞48h,可以显著上调血小板衍生生长因子基因表达(P<0.01);作用72h可显著上调星形胶质细胞血管内皮细胞生长因子、神经生长因子和血小板衍生生长因子基因表达(P<0.01)。结论:黄芩苷作用于脑微血管内皮细胞可诱导神经干细胞向神经元分化,黄芩苷同时作用于脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞可诱导神经干细胞向神经元定向分化并促进其成熟,可能与黄芩苷调控脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞生长因子分泌,改善微环境有关。

主 题 词：干细胞 神经系统 黄芩苷 毛细血管 内皮 星形细胞 细胞分化 

学科分类：1006[医学-中西医结合类] 1005[医学-中医学类] 100513[100513] 100602[100602] 10[医学] 

馆 藏 号：203548346...