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鸭Ⅰ型肝炎病毒VP1基因片段的克隆与表达载体的构建

鸭Ⅰ型肝炎病毒VP1基因片段的克隆与表达载体的构建

作     者:赵瑞宏 张丹俊 潘孝成 程宝艳 胡晓苗 ZHAO Rui-hong;ZHANG Dan-jun;PAN Xiao-cheng;CHENG Bao-yan;HU Xiao-miao

作者机构:安徽省农业科学院畜牧兽医研究所合肥230031 

基  金:院长青年创新基金项目"鸭肝炎病毒抗原基因的表达和提纯" 国家科技支撑计划项目"水禽灾后恢复与重建关键技术研究与集成示范"(2008BADC1B03) 

出 版 物:《中国畜牧兽医》 (China Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期:2010年第37卷第7期

页      码:67-70页

摘      要:为研究鸭肝炎病毒VP1基因在大肠杆菌中的表达情况,根据鸭肝炎病毒核苷酸序列设计1对外引物和1对含有EcoRⅠ和SalⅠ酶切位点的内引物。以内外引物进行PCR扩增,将所得PCR产物回收,以相同的限制性内切酶酶切目的基因和表达载体pET-32a后构建重组表达载体,并转入宿主菌BL21和Rosseta,经酶切、PCR和测序鉴定,证明VP1基因正确插入了表达载体。用不同浓度的IPTG诱导VP1基因的表达,收集菌液进行SDS-PAGE电泳,结果表明,VP1基因片段在大肠杆菌Rosseta和BL21中均难以表达。

主 题 词:鸭肝炎病毒R85952株 VP1基因 克隆 表达 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

馆 藏 号:203549059...

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