扩展青霉DNA提取及PCR检测条件的优化

作     者：何鸿举 樊明涛 刘晓娇 吕丽娟 焦凌霞 HE Hongqu;FAN Ming-tao;LIU Xiao-jiao;LU Li-juan;JIAO Ling-xia

作者机构：西北农林科技大学食品科学与工程学院陕西杨凌712100 河南科技学院食品学院河南新乡453003 

基　　金：教育部博士点基金项目(200807120017) 陕西省科技攻关项目(2007K01-12) 

出 版 物：《食品科学》 (Food Science)

年 卷 期：2011年第32卷第10期

页      码：115-119页

摘      要：研究扩展青霉DNA的提取及其聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测条件的优化。分别采用玻璃珠法、氯化苄法、玻璃珠+氯化苄法提取扩展青霉菌及对照菌株的基因组DNA,经紫外测定和电泳检测实验,分析提取DNA的质量浓度和纯度;同时,根据扩展青霉多聚半乳糖醛酸酶基因内一段保守序列设计合成一对288bp的扩增引物,并对PCR检测条件进行优化。结果表明:玻璃珠+氯化苄法提取到的DNA质量浓度和纯度较理想,扩展青霉DNA可获得良好的特异性扩增,PCR扩增的最适退火温度为53～59℃,最适引物浓度为0.04～0.16μmol/L,最适模板质量浓度为2.40～5.28μg/mL,dNTPs浓度对PCR扩增影响不大。运用实验所得优化参数检测扩展青霉菌,整个过程仅需3～4h,和传统的培养检测法相比,该方法可有效提高检测效率,可进一步将该方法应用于实践。

主 题 词：扩展青霉 基因组DNA 聚合酶链式反应(PCR) 优化 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1007[医学-药学类] 100705[100705] 07[理学] 071005[071005] 10[医学] 

核心收录：

馆 藏 号：203549391...