烟草黄瓜花叶病毒一步法RT-PCR检测试剂盒的研制与初步应用

作     者：张俊祺 刘相兵 罗朝鹏 杨军 宋纪真 尹启生 宋浩 ZHANG JUN-QI;LIU XIANG-BING;LUO ZHAO-PENG;YANG JUN;SONG JI-ZHEN;YIN QI-SHENG;SONG HAO

作者机构：中国烟草总公司郑州烟草研究院 湖南中烟工业有限责任公司长沙市劳动中路426号410007 

基　　金：国家烟草专卖局科技项目 郑州烟草研究院科技项目"烟草主要病毒病分子变异监控及追踪技术研究"(122009CZ0410) 

出 版 物：《烟草科技》 (Tobacco Science & Technology)

年 卷 期：2011年第44卷第10期

页      码：65-69页

摘      要：为快速准确地检测烟草黄瓜花叶病毒(CMV),根据黄瓜花叶病毒基因组序列相对保守区域设计了一对特异性引物,整合了反转录和PCR反应所需酶和缓冲液,通过反应条件的优化,建立了基于一步法RT-PCR检测烟叶感染CMV的方法,在此基础上组装了检测试剂盒。进一步分析了该试剂盒的特异性、稳定性和检测灵敏度。结果表明,该试剂盒具有很强的特异性、良好的重复性和较高的灵敏度(模板RNA浓度最低达到10 ng量级)。初步应用结果显示,在多个烟区采集的病叶样品检测结果均与ELISA检测结果一致,能够成功检测出CMV。

主 题 词：黄瓜花叶病毒 RT-PCR 检测试剂盒 特异性 稳定性 灵敏度 

学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1002-0861.2011.10.016

馆 藏 号：203549607...