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尼罗罗非鱼MyD88基因荧光定量PCR检测方法的建立

尼罗罗非鱼MyD88基因荧光定量PCR检测方法的建立

作     者:王倩 邹芝英 李大宇 祝璟琳 肖炜 杨弘 Wang Qian;Zou Zhiying;Li Dayu;Zhu Jinglin;Xiao Wei;Yang Hong

作者机构:中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081 南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081 

基  金:现代农业产业技术体系建设专项资金"罗非鱼产业技术体系"(CARS-49) 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金"罗非鱼髓样分化因子的克隆和表达分析"(2011JBFA04) 

出 版 物:《中国农学通报》 (Chinese Agricultural Science Bulletin)

年 卷 期:2012年第28卷第5期

页      码:92-97页

摘      要:为了准确分析尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)髓样分化因子(myeloid differentiation factor88,MyD88)在天然免疫反应中的作用,根据MyD88EST序列(GenBank登录号:GR679416.1)和β-actin基因序列(GenBank登录号:AB037865.1),分别在保守区域设计并合成引物。实验利用5倍系列稀释的尼罗光罗非实鱼时肝定脏量cPDCNRA检样测品方构法建。标应准用曲2线-ΔΔ并Ct分进析行方融法解初曲步线检分测析了,建尼立罗尼罗罗非罗鱼非肝鱼脏M、脾yD脏88、的血S液Y和BR肌G肉re等en不Ⅰ荧同组织中的MyD88相对表达量。扩增结果表明,MyD88和β-actin基因标准曲线CT值检测范围分别为24~35和19~30,扩增效率分别为100%和96.7%,相关系数分别为0.998和0.995;熔解曲线分析显示产物均形组织成肝单脏一、特脾异脏峰和,血Tm液值中分高别丰为度78表.5达℃和。77.5℃。定量分析结果显示。

主 题 词:尼罗罗非鱼 MyD88 β-actin 实时荧光定量PCR 2-ΔΔCt分析方法 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 071010[071010] 07[理学] 

D O I:10.3969/j.issn.1000-6850.2012.05.018

馆 藏 号:203549883...

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