马Toll样受体表达水平SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测方法的建立

作     者：赵一萍 白东义 李蓓 黄金龙 张宇宏 芒来 ZHAO Yi-ping;BAI Dong-yi;LI Bei;HUANG Jin-long;ZHANG Yu-hong;DUGARJAVIIN Mang-lai

作者机构：内蒙古农业大学动物科学学院呼和浩特010018 

基　　金：内蒙古自治区科技厅重大项目(20091404) 内蒙古农业大学科技创新团队支持计划(NDTD2010-12) 

出 版 物：《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期：2013年第44卷第2期

页      码：220-227页

摘      要：旨在建立一种检测马Toll样受体(TLRs)mRNA表达水平的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR(Rverse Transcription-Polymerase Chain Reaction)方法。参照GenBank中马TLRs的基因序列保守区设计特异性引物,以马β肌动蛋白(β-actin)mRNA为内参,建立荧光定量RT-PCR方法。结果,扩增曲线在1×102～1×108copies.μL-1范围内有很好的线性关系,扩增相关系数在0.990以上,扩增效率在1.0左右。熔解曲线分析表明,产物为特异单峰,无引物二聚体,具有较高的特异性和灵敏度。重复性结果表明,该方法的组内、组间变异系数均小于3.50%,重复性较好。临床样品检测结果表明,TLR1、TLR2、TLR3、TLR4、TLR6、TLR7、TLR8和TLR9在骨髓中均有表达,其中TLR4mRNA表达水平最高,TLR9mRNA表达水平最低。本研究建立的检测方法能够成功用于临床样品的检测,为研究马匹TLRs在mRNA水平的定量分析提供技术平台。

主 题 词：马 Toll样受体 骨髓 SYBR Green Ⅰ 荧光定量RT-PCR 

学科分类：0905[农学-林学类] 09[农学] 090501[090501] 

核心收录：

馆 藏 号：203550296...