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动物胃肠道钙吸收关键基因表达实时荧光定量PCR检测方法的建立

动物胃肠道钙吸收关键基因表达实时荧光定量PCR检测方法的建立

作     者:莘海亮 吴文旋 李胜利 

作者机构:贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 动物营养学国家重点实验室北京100193 

基  金:国家自然科学基金(编号:30901038 31160468) 动物营养学国家重点实验室开放课题(编号:2004DA125184F1115) 

出 版 物:《江苏农业科学》 (Jiangsu Agricultural Sciences)

年 卷 期:2013年第41卷第4期

页      码:31-34页

摘      要:近年来,Real-Time PCR(RT-PCR)已成为定量检测基因表达水平的强有力工具,本研究以小鼠为研究对象,旨在应用这一技术建立动物胃肠道组织CaBP-D9k、TRPV6和VDR表达含量的检测技术体系。提取昆明小鼠(n=12)胃肠道组织总RNA并反转录,根据GenBank小鼠CaBP-D9k、TRPV6和VDR已登录序列设计特异引物,建立了SYBR Green Real-Time PCR检测方法。结果表明:CaBP-D9k、TRPV6、VDR、β-actin的标准曲线决定系数(r2)分别为0.995 3、0.998 5、0.997 3,融解曲线均为单一峰,且扩增产物与目的基因相符。综上所述,本研究建立了CaBP-D9k、TRPV6、VDR基因的定量分析检测技术体系,可为研究动物胃肠道钙跨膜吸收过程的分子机理奠定基础。

主 题 词:胃肠道 CaBP—D9k TRPV6 VDR 实时荧光定量PCR 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D O I:10.3969/j.issn.1002-1302.2013.04.010

馆 藏 号:203550384...

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