大鼠WAP启动子指导人TPO在真核细胞中瞬时表达

作     者：李妍 陈艳 周明乾 周宏伟 宁云山 

作者机构：南方医科大学生物技术学院广东广州510515 南方医科大学公共卫生与热带医学学院 

基　　金：国家科委"1035"重大项目(96-901-009) 广东省自然科学基金(963011) 

出 版 物：《中国公共卫生》 (Chinese Journal of Public Health)

年 卷 期：2014年第30卷第2期

页      码：200-203页

摘      要：目的构建以大鼠WAP启动子调控的人血小板生成素(TPO)真核表达质粒并进行瞬时表达,探讨TPO基因组中不同内含子对TPO表达影响。方法通过基因工程方法构建以大鼠WAP启动子调控的6种TPO真核表达质粒,并通过酶切和测序进行鉴定,将上述重组质粒分别在HC-11和COS-1细胞上转染48 h后,通过双抗体夹心ELISA定量分析转染上清中TPO表达。结果酶切及测序分析表明构建与设计相符,6种重组质粒在COS-1细胞和HC-11细胞中均获得表达,其表达水平从高到低依次为pTPOWE>pTPOWA>pTPOWD>pTPOWB>pTPOWC>pTPOWF,其中含有TPO IntronⅤ的重组质粒pTPOWE表达量最高,而含有TPO全基因组的重组质粒pTPOWF表达量最低。结论 IntronⅤ可能含有特殊增强TPO表达序列,而TPO基因组中可能存在抑制TPO高水平表达结构元件。

主 题 词：血小板生成素 内含子 基因表达 大鼠WAP启动子 

学科分类：1001[医学-基础医学] 10[医学] 

D　O　I：10.11847/zgggws2014-30-02-22

馆 藏 号：203550710...