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CSFV及美洲型、欧洲型PRRSV多重qRT-PCR鉴别检测方法的建立及应用

CSFV及美洲型、欧洲型PRRSV多重qRT-PCR鉴别检测方法的建立及应用

作     者:施开创 邹联斌 胡杰 张步娴 莫胜兰 官家明 陈汉忠 SHI Kai-chuang;ZOU Lian-bin;HU Jie;ZHANG Bu-xian;MO Sheng-lan;GUAN Jia-ming;CHEN Han-zhong

作者机构:广西动物疫病预防控制中心广西南宁530001 广西大学动物科学技术学院广西南宁530005 

基  金:广西科学基金项目(桂科青0832057) 广西科学研究与技术开发计划项目(桂科转14125004-22) 

出 版 物:《家畜生态学报》 (Journal of Domestic Animal Ecology)

年 卷 期:2015年第36卷第3期

页      码:63-68页

摘      要:根据猪瘟病毒(CSFV)以及猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因组序列特点,设计3对特异性引物和3条TaqMan探针,经过反应条件的优化,建立了能同时检测并区分CSFV以及美洲型、欧洲型PRRSV的多重TaqMan荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)方法。该方法具有特异性强、敏感性高、重复性好的特点,可以特异扩增CSFV和PRRSV,而与猪的其它常见病毒无交叉反应;对CSFV及美洲型、欧洲型PRRSV3种重组质粒标准品的检出下限均为2.68拷贝/μL;组内及组间重复试验的变异系数均小于1.5%。应用该方法对253份临床疑似样品进行检测,结果病原阳性106份,其中20份为CSFV阳性,86份为美洲型PRRSV阳性,11份为CSFV和美洲型PRRSV混合感染,未检测到欧洲型PRRSV。试验表明,研究建立的多重qRT-PCR方法可用于CSFV和PRRSV的快速鉴别检测及流行病学调查。

主 题 词:猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 多重TaqMan荧光定量RT-PCR 

学科分类:0905[农学-林学类] 09[农学] 

D O I:10.3969/j.issn.1673-1182.2015.03.012

馆 藏 号:203551372...

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