苦瓜谷氨酰胺合成酶基因(McGS1)原核表达载体的构建及表达分析

作     者：申龙斌 牛玉 刘子记 刘昭华 扬衍 SHEN Longbin;NIU Yu;LIU Ziji;LIU Zhaohua;YANG Yan

作者机构：中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所农业部华南作物基因资源与种质创制重点开放实验室海南儋州571737 

基　　金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金资助项目(1630032013007 1630032015015) 

出 版 物：《北方园艺》 (Northern Horticulture)

年 卷 期：2015年第22期

页      码：110-113页

摘      要：以"热研3号"苦瓜为试材,根据苦瓜谷氨酰胺合成酶基因(McGS1)全长序列信息设计引物,提取"热研3号"苦瓜总RNA并反转录成cDNA作为模板,通过PCR扩增、产物测序、酶切等方法与pET-30a(+)原核表达载体相连,构建苦瓜McGS1基因原核表达载体,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达分析,研究不同IPTG浓度及诱导时间对苦瓜McGS1基因蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中表达的影响。结果表明:该研究成功构建了苦瓜McGS1基因的原核表达载体,37℃、0.2μmol/L IPTG诱导4h苦瓜McGS1基因蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中可高效表达,表达的蛋白质分子量约为35kDa。

主 题 词：苦瓜 谷氨酰胺合成酶 原核表达 

学科分类：09[农学] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 090202[090202] 

D　O　I：10.11937/bfyy.201522029

馆 藏 号：203555493...