RNA干扰血管紧张素原基因表达对前脂肪细胞3T3-L1分化的影响

作     者：黄志立 张丽君 伍丽华 王妍 杨汝德 HUANG Zhili;ZHANG Lijun;WU Lihua;WANG Yan;YANG Rude

作者机构：深圳职业技术学院应用化学与生物技术学院广东深圳518055 华南理工大学生物科学与工程学院广东广州510640 

基　　金：广东省教育厅产学研结合项目资助课题(2012B091100408) 深圳市科技计划项目资助课题(07KJba160) 广东省深圳市创新委新兴产业公共技术服务平台项目资助课题(GGJS20130331152344401) 

出 版 物：《吉林大学学报（医学版）》 (Journal of Jilin University：Medicine Edition)

年 卷 期：2015年第41卷第6期

页      码：1195-1200,I0014页

摘      要：目的:构建靶向血管紧张素原(AGT)基因的RNA干扰质粒,研究AGT基因对鼠前脂肪3T3-L1分化的影响。方法:设计靶向AGT的小分子RNA干扰片段(AGT-shRNA),以未靶向任何DNA的小分子RNA(Non-shRNA)为对照,利用载体psiRNA-U6.1/Neo构建重组表达质粒,转染鼠前脂肪细胞3T3-L1并筛选到稳定转染细胞株,RT-PCR和SDS-PAGE法分别检测AGT基因沉默效果,通过显微镜观察和脂肪细胞分化标志物检测来确定AGT基因干扰对3T3-L1细胞分化的影响。结果:成功构建AGT干扰质粒,与对照组比较,AGT基因转录水平受到显著抑制(P<0.05),AGT蛋白表达水平也仅为对照的43.86%。AGT基因干扰后3T3-L1细胞脂质水平和甘油-3-磷酸脱氢酶(GPDH)活性仍随分化时间延长呈上升趋势,但增长量明显低于对照组(P<0.05)。结论:RNA干扰AGT基因可明显抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化,提示脂肪组织中的肾素-血管紧张素系统(RAS)与脂肪代谢有重要关联。

主 题 词：血管紧张素原 RNA干扰 3T3-L1 分化 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100101[100101] 10[医学] 

D　O　I：10.13481/j.1671-587x.20150619

馆 藏 号：203555525...