唾液富组蛋白5的原核表达、纯化与抗菌活性鉴定

作     者：金科华 JIN Ke-hua

作者机构：湖北科技学院基础医学院湖北咸宁437100 

出 版 物：《湖北农业科学》 (Hubei Agricultural Sciences)

年 卷 期：2012年第51卷第8期

页      码：1696-1698页

摘      要：设计一对3′端互补、5′端带酶切位点的引物,用PCR扩增唾液富组蛋白5(H5)基因(h5),将载体pGEX4T-2和h5双酶切、连接、转化DH5α,将筛选鉴定的重组质粒pGEX4T-2-h5转化BL21(DE3)。诱导重组菌BL21(DE3)-pGEX4T-2-h5表达,纯化融合蛋白GST-H5,用Thrombin切去GST标签获取重组H5(rH5),测试rH5抗白色念珠菌(Candida albicans)活性。试验成功构建了重组载体pGEX4T-2-h5,在37℃重组菌BL21(DE3)-pGEX4T-2-h5生长至OD600 nm=0.6时用1 mmol/L IPTG于20℃诱导9 h,可获得高水平表达的融合蛋白GST-H5;酶切后获得的rH5对白色念珠菌生长有较强的抑制作用,rH 5产率约2 mg/L。

主 题 词：唾液富组蛋白5(H5) 融合蛋白GST-H5 原核表达 白色念珠菌(Candida albicans) 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.0439-8114.2012.08.050

馆 藏 号：203556149...