应用RNA干扰阻抑小鼠L929细胞MHCⅡ类基因表达及功能的研究

作     者：路丽明 丁庆 杨能 周晓荣 周芸 周光炎 LU Li-ming,LU Qing-ding,YANG Neng,ZHOU Xiao-rong,ZHOU Yun,CHOU Kuang-yan(Shanghai Institute of Immunology,Shanghai Jiaotong University,Medical College,Shanghai 200025,China)

作者机构：上海交通大学医学院上海市免疫学研究所上海200025 

基　　金：国家自然科学基金重点资助项目(30532690) 国家自然科学基金青年项目(30700766) 

出 版 物：《现代免疫学》 (Current Immunology)

年 卷 期：2009年第29卷第6期

页      码：464-469页

摘      要：为了探讨RNA干扰技术对小鼠CⅡTA(II类反式激活因子)以及MHC Ⅱ类基因表达和功能的影响。我们首先设计并合成4条小干扰RNA(small-interfering RNA,siRNA)(siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3和siRNA-4)序列,在阳离子脂质体的介导下转染小鼠L929细胞。48h后,用半定量RT-PCR和定量PCR方法检测CⅡTA mRNA的变化;流式细胞仪检测I-Ab分子表达的变化。接着构建了CIITA特异的短发夹状干扰RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体,通过在靶细胞内转录形成具有特异干扰作用的shRNA,高效、特异的阻断CⅡTA基因的表达,形成Ⅱ类基因功能缺陷或使其表达降低。进一步混合淋巴细胞反应观察同种异基因CD4+T细胞对稳定转入RAN干扰载体的L929细胞的免疫应答强度,结果证实该L929细胞对不同受者CD4+T细胞的刺激能力分别下降73.90%和76.34%。以上结果为减低同种异体/异种器官细胞性排斥提供了新的思路和手段。

主 题 词：MHCⅡ类转录激活因子 siRNA Ⅰ-A MHCⅡ类基因 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

馆 藏 号：203557238...