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正交试验在人乳头瘤病毒16型E2蛋白原核表达优化中的应用

正交试验在人乳头瘤病毒16型E2蛋白原核表达优化中的应用

作     者:商庆龙 马延秀 郭志伟 李立群 郝美丽 孙宇辉 魏兰兰 谷鸿喜 Shang Qinglong1 Ma Yanxiu1 Guo Zhiwei1 Li Liqun1 Hao Meili1 Sun Yuhui2 Wei Lanlan1 Gu Hongxi11(Department of Microbiology,Harbin Medical University;Heilongjiang Key Laboratory of Infection and Immol/Lunity,Pathogenic-biological Key Laboratory,Heilongjiang Higher Education Institutions,Harbin 150081,China)2(Department of Gynecology and Obstetrics,First Affiliated Hospital,Harbin Medical University,Harbin 150001,China)

作者机构:哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省高校病原学重点实验室哈尔滨150081 哈尔滨医科大学附属第一医院妇产科哈尔滨150001 

基  金:黑龙江省教育厅面上基金资助项目(11551236) 

出 版 物:《生物医学工程学杂志》 (Journal of Biomedical Engineering)

年 卷 期:2011年第28卷第5期

页      码:988-991页

摘      要:鉴定人乳头瘤病毒(HPV)16型E2蛋白的重组表达菌株,通过正交试验快速优化诱导表达条件,增加目的蛋白的表达量。应用SDS-PAGE及Western blot分析鉴定表达后的蛋白。选取诱导时间、诱导剂浓度、细菌密度OD600和诱导温度共4个主要外部因素。采用四因素两水平正交试验设计,以单位体积内HPV16 E2目的蛋白含量作为检测指标,结果用SPSS 13.0软件进行统计分析。结果表明,HPV16 E2菌株鉴定正确。HPV16 E2蛋白表达主要以不溶性蛋白为主,主要影响因素是诱导剂浓度和诱导温度,最佳诱导条件为37℃、1.0 mmol/L IPTG和OD600为1.0的条件下诱导7 h,正交试验对分子生物学反应的影响因素分析和条件优化有借鉴意义。

主 题 词:人乳头瘤病毒16型E2蛋白 正交试验 原核表达 条件优化 

学科分类:0831[工学-公安技术类] 1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 0836[0836] 10[医学] 

核心收录:

馆 藏 号:203557359...

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