鸭肠炎病毒核衣壳蛋白基因的克隆与原核表达

作     者：代淑燕 寨鸿瑞 文明 刘忠伟 周碧君 DAI Shu-yan;ZHAI Hong-rui;WEN Ming;LIU Zhong-wei;ZHOU Bi-jun

作者机构：贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 

基　　金：国家自然科学基金项目资助("鸭肠炎病毒核衣壳蛋白与宿主细胞结合蛋白的相互作用研究" No.30760182) 

出 版 物：《生物技术》 (Biotechnology)

年 卷 期：2008年第18卷第4期

页      码：12-15页

摘      要：目的：对DEV贵州分离株NP基因进行克隆与序列分析，构建NP基因的原核表达载体，分析NP基因原核表达产物的免疫反应性。方法：根据GeneBank登载的DENNP基因序列设计引物，对DEV贵州分离株进行PCR扩增、克隆和测序，采用生物信息学软件程序分析NP蛋白的氨基酸序列；将该基因插入到原核表达载体pET32a上进行原核表达和Western Blotting分析。结果：DEV贵州分离株NP基因全长759bp，核苷酸序列与参考株一致；NP基因编码蛋白相对分子量为27．1kDa，理论pI为5．89，肽链上第10．15、88．92和182．186区段及其附近区域可能是B细胞表位优势区；构建得到的重组质粒pET32-NP可表达出一条大小约为48kDa的蛋白，且能与兔抗DEN-IgG发生特异性结合。结论：NP基因在DEN基因组中高度保守，其原核表达产物具有良好的免疫反应性。

主 题 词：鸭肠炎病毒 核衣壳蛋白基因 序列分析 原核表达 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16519/j.cnki.1004-311x.2008.04.030

馆 藏 号：203557361...