体外转染JWA核酶反转录病毒载体对人肺动脉平滑肌细胞表型及迁移的影响

作     者：陆俊羽 张珍祥 徐永健 邹晖 倪望 陈士新 Lu Jun-yu;Zhang Zhen-xiang;Xu Yong-jian;Zou Hui;Ni Wang;Chen Shi-xin

作者机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸内科湖北省武汉市430030 

基　　金：国家自然科学基金(30300149) 中国博士后科学基金(2005037677)~~ 

出 版 物：《中国临床康复》 (Chinese Journal of Clinical Rehabilitation)

年 卷 期：2005年第9卷第43期

页      码：66-69,i0001页

摘      要：目的:探讨JWA核酶基因转染对肺动脉平滑肌细胞表型及迁移的影响。方法:实验于2004-08/2005-04在华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸病研究室完成。质粒pLXSN为第三军医大学附属新桥医院呼吸研究所惠赠。人肺动脉平滑肌细胞(C-12521)及平滑肌细胞生长培养基2(C-22162)购自德国PromoCell公司。设计合成JWA核酶基因并构建于反转录病毒载体pLXSN上,转染体外培养的人肺动脉平滑肌细胞,经鉴定证实转染成功后,应用半定量反转录聚合酶链反应法测定细胞内JWAmRNA的表达,改良Boyden小室法测定细胞迁移情况,半定量反转录聚合酶链反应法及免疫细胞化学法检测α-SMactin表达量反映细胞表型变化。结果:转染JWA核酶基因的细胞(P-JWARZ)JWAmRNA表达量较空载体转染细胞(P-pLXSN)及未转染细胞(肺动脉平滑肌细胞)显著降低,细胞迁移率显著增加,α-SMactin表达量显著减少(JWAmRNA:0.5812±0.0455,0.7823±0.0292,0.8169±0.0289;细胞迁移:29.6±4.72,7.2±1.44,6.6±1.92;α-SMactinmRNA:0.4418±0.0202,0.4767±0.0209,0.2661±0.0119;α-SMactin蛋白:0.2211±0.0093,0.3251±0.0085,0.3200±0.0095,P<0.01)。结论:JWA核酶基因转染可抑制人肺动脉平滑肌细胞内JWA基因的表达,使细胞分化为合成表型,促进细胞迁移。

主 题 词：肺动脉 肌细胞,平滑肌 表型 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100201[100201] 10[医学] 

D　O　I：10.3321/j.issn:1673-8225.2005.43.030

馆 藏 号：203557684...