猪肺炎支原体P97 TaqMan-BHQ荧光定量PCR检测方法的建立及应用

作     者：武昱孜 靳蒙蒙 白方方 张旭 华利忠 雷治海 邵国青 

作者机构：江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210014 

基　　金：江苏省农业自主创新基金项目[CX(11)2059] 国家自然科学基金项目(31100135) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2012年第42卷第12期

页      码：1268-1272页

摘      要：根据猪肺炎支原体(Mhp)P97基因的保守序列设计合成了引物和TaqMan-BHQ探针,建立了快速检测Mhp的TaqMan-BHQ荧光定量PCR方法。结果显示,该方法特异性良好,与其他病原不发生交叉反应;最低检测限可达10copies/μL,敏感性高;不同梯度定量模板的拷贝数的对数值与Ct值之间的线性关系表达式为Ct=-3.426×lg(conc)+43.343,有良好的线性关系,标准曲线的相关系数为0.997,扩增效率为95.85%,重复性良好。对江苏省某猪场的48份猪肺组织进行荧光定量PCR检测,结果有43份肺组织呈现阳性,阳性检出率为89.58%,比巢式PCR的敏感性高。表明,该检测方法能用于Mhp的快速检测,可对猪支原体肺炎的早期诊断和流行病学调查提供新的技术手段。

主 题 词：猪肺炎支原体 P97基因 荧光定量PCR TaqMan-BHQ探针 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2012.12.013

馆 藏 号：203558262...