牛传染性鼻气管炎病gB蛋白的截短表达及间接ELISA方法的建立

作     者：曹翀 曹永生 宋林 高明春 彭统全 张树栋 王君伟 CAO Chong;CAO Yong-sheng;SONG Lin;GAO Ming-chun;PENG Tong-quan;ZHANG Shu-dong;WANG Jun-wei

作者机构：东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 黑龙江水产研究所黑龙江哈尔滨150001 

基　　金：现代农业(奶牛)产业技术体系(CARS-37) 国家科技支撑计划项目(2012BAD12B05) 国家科技支撑计划子课题(2012BAD12B03-3) 黑龙江省科技攻关项目(GA09B302) 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2015年第37卷第2期

页      码：123-127页

摘      要：为建立检测牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）的间接ELISA方法,本研究根据Gen Bank登录的IBRV全基因组序列,设计引物扩增糖蛋白B（g B）基因编码第190～524氨基酸残基（aa）的基因,构建重组质粒p ET-g B进行原核表达。SDS-PAGE结果显示目的蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式表达,大小约为40 ku。Western blot鉴定表明目的蛋白具有良好的反应原性。以纯化的g B蛋白作为包被抗原建立了间接ELISA检测方法,该方法敏感性好,特异性强,与其他病原血清无交叉反应,其组内组间变异系数均低于11%。与IDEXX公司的g B-ELISA试剂盒进行对比,阳性符合率为84.28%,阴性符合率为85.71%。采用本研究建立的方法对黑龙江省10个农场的血清样品进行了IBR的流行性调查,阳性率最高为65.52%,最低为5.56%,平均阳性率为18.01%。本研究建立的ELISA方法为进出口检疫和该病防制工作提供一种可选方法。

主 题 词：牛传染性鼻气管炎病毒 gB蛋白 原核表达 间接ELISA 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-0589.2015.02.10

馆 藏 号：203558279...