组氨酸蛋白激酶EnvZ抑制剂对福氏志贺菌毒力影响的初步研究

作     者：陈明亮 王琪 董生福 秦智强 张健 韩聪 沈旭 瞿涤 CHEN Ming-liang;WANG Qi;DONG Sheng-fu;QIN Zhi-qiang;ZHANG Jian;HAN Cong;SHEN Xu;QU Di

作者机构：复旦大学上海医学院-生物医学研究院和病原微生物研究所-医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032 中国科学院上海药物研究所药物发现与设计中心上海201203 

基　　金：国家重大基础研究专项(973)(2002CB512803) 国家自然科学基金(3040017 30628001) 上海市科技发展基金项目(02DJ14002 055407069) 

出 版 物：《复旦学报（医学版）》 (Fudan University Journal of Medical Sciences)

年 卷 期：2007年第34卷第3期

页      码：317-322页

摘      要：目的初步研究福氏志贺菌组氨酸蛋白激酶EnvZ抑制剂对福氏志贺菌毒力的影响。方法通过构建志贺菌:EnvZ胞内段(SF-EnvZc)蛋白的原核表达质粒,表达并纯化SF-EnvZc蛋白,在SPECS公司的小分子化合物库中模拟筛选出的10个候选EnvZ抑制剂的基础上,通过体外磷酸化的方法筛选出能够有效地抑制SF- EnvZc蛋白磷酸化的小分子化合物(EnvZ抑制剂),然后采用表面等离子共振(SPR)技术检测EnvZ抑制剂与SF-EnvZc蛋白的结合力,并采用小鼠角结膜志贺菌感染模型检测EnvZ抑制剂对福氏志贺菌株Sf9380毒力的影响。结果在10个候选EnvZ抑制剂中,化合物1、2、3能够有效地抑制SF-EnvZc蛋白的磷酸化,其IC50值分别为(70．17±5．83)、(10．18±0．86)和(37．66±9．64)μmol／L,且上述3个化合物表现出对SF-EnvZc蛋白的高亲和力,其平衡解离常数(Kd)分别为4．08、3．57和2．94μmol／L,其中化合物1和2能够明显抑制福氏志贺菌株Sf9380导致的小鼠角结膜炎症反应(由■变为-),化合物3能够明显降低其炎症反应(由■降为+),化合物1、2、3的最小有效浓度分别为12．5、12．5和100μmol／L结论筛选出3个EnvZ抑制剂,化合物1、2、3能够不同程度地抑制或降低福氏志贺菌导致的小鼠角结膜炎症反应,提示EnvZ抑制剂能够降低福氏志贺菌的毒力。

主 题 词：福氏志贺菌 组氨酸蛋白激酶 表面等离子共振 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1672-8467.2007.03.001

馆 藏 号：203563163...