H5亚型禽流感病毒的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测技术

作     者：谢青梅 曹永长 张祥斌 李少璃 冀君 马静云 毕英佐 XIE Qing-mei;CAO Yong-chang;ZHANG Xiang-bin;LI Shao-li;JI Jun;MA Jing-yun;BI Ying-zuo

作者机构：华南农业大学动物科学学院广东广州510642 中山大学生命科学学院广东广州510275 

基　　金：广东省重大科技专项资助项目(2005A20901004 2006A20901003 2007A020400006) 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2010年第30卷第1期

页      码：41-46页

摘      要：根据GenBank中H5N1亚型流感病毒HA基因保守区的序列，设计1组对应HA序列6个区域的4条特异性引物进行核酸扩增，建立RT～LAMP反应体系，优化LAMP反应条件，最佳等温扩增反应条件为65℃保温60min。扩增后产物加入核酸染色剂SYBRI和4mmol／L Mg^2＋，结果可视。扩增产物可用特异性内切酶KpnI进行酶切鉴定。用已建立的RT—LAMP技术检测临床样品，检测结果与RT—PCR方法一致。RT—LAMP技术整个检测过程只需1～2h，不需要PCR仪和成像系统，仅需要一恒温水浴锅即可完成试验。通过特异性、敏感性试验，验证了建立的RT-LAMP技术可以作为一种操作简单，灵敏性、特异性高的检测H5亚型禽流感病毒的方法。

主 题 词：H5亚型禽流感病毒 HA RT—LAMP 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.16303/j.cnki.1005-4545.2010.01.022

馆 藏 号：203564184...