大熊猫GM-CSF基因的克隆与分析及GM-CSF生物学活性的检测

作     者：李凤琴 徐志文 朱玲 古锋 王承东 李德生 郭万柱 

作者机构：四川农业大学动物医学院动物生物技术中心四川雅安625014 中国保护大熊猫研究中心雅安碧峰峡基地四川雅安625014 

基　　金：卧龙大熊猫俱乐部基金项目(201001) 四川省青年科技基金项目(2012JQ0037) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2012年第42卷第10期

页      码：1063-1067页

摘      要：用含刀豆蛋白的营养液培养大熊猫外周血中分离的淋巴细胞,72h后抽提RNA。设计1对引物,通过RT-PCR方法对大熊猫GM-CSF基因片段进行扩增。测序后对其进行分析,并将该序列克隆到pCI-neo真核载体中,命名为pCI-G,然后免疫健康小鼠,同时设立pCI-neo载体和PBS免疫组为对照。序列分析结果显示,该基因片段含一个完整的开放性阅读框,编码144个氨基酸,与其他几个物种同源性为76.1%～86.2%,预测蛋白中含较多的α-螺旋区域,主要集中在3个区域。免疫结果显示,与对照组相比,pCI-G能够引起小鼠体内IL-4和IFN-γ持续快速的增长,在首免后第56天,二者的质量浓度可达到70.86pg/mL±4.22pg/mL和237.39pg/mL±3.17pg/mL。该质粒可增强小鼠Th2型和Th1型免疫应答,是极具应用潜力的细胞因子。

主 题 词：大熊猫 GM-CSF基因 生物学活性 白细胞介素4 γ-干扰素 

学科分类：090602[090602] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2012.10.019

馆 藏 号：203565482...