实时荧光定量RT-PCR技术快速检测H5亚型禽流感病毒

作     者：吕恒 张锦海 王长军 顾海涛 王平 鲁娟东 LV Heng;ZHANG Jin-hai;WANG Chang-jun;GU Hai-tao;WANG Ping;LU Juan-dong

作者机构：南京军区疾病预防控制中心南京210002 

基　　金：江苏省科技支撑计划(社会发展)项目(No.BE2012609) 国家重大传染病专项课题(No.2008ZX10004-008) 国家"十一五"科技重大项目(No.2009ZX10004-315) 南京军区重点课题(No.10Z038) 南京军区重点课题(No.11C040) 

出 版 物：《解放军预防医学杂志》 (Journal of Preventive Medicine of Chinese People's Liberation Army)

年 卷 期：2012年第30卷第6期

页      码：398-401页

摘      要：目的建立快速检测H5亚型禽流感病毒HA基因的实时荧光定量RT-PCR方法,为禽流感病毒的监测和感染的预防控制提供科学的技术手段。方法针对H5亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因保守区域设计特异性引物与荧光探针;通过体外克隆技术获得阳性定量标准品;优化探针、引物浓度、反应体系与反应条件,提高检测方法的特异性、敏感性与重复性,并进行定量分析。结果反应体系具有良好的扩增效率,80 min内可完成扩增检测工作;检测灵敏度为100拷贝/反应,通过外标准品建立的标准曲线在一条直线上;3个外标准品的变异系数(CV)分别为2.60%、2.47%、2.44%;H5亚型禽流感病毒培养液、确诊人感染高致病性禽流感患者标本为阳性扩增结果,而其它流感病毒临床标本及阴性对照均呈阴性。结论本研究建立的实时荧光定量RT-PCR方法具有敏感、快速、重复性好的特点,适合于H5亚型禽流感病毒的快速定量检测。

主 题 词：实时荧光定量RT-PCR H5亚型禽流感病毒(AIVH5) 血凝素基因 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.13704/j.cnki.jyyx.2012.06.017

馆 藏 号：203565571...