含B7-H1 shRNA基因的慢病毒表达载体的制备及其抑制效果鉴定

作     者：皇甫罗锴 王曦 郭张燕 席文锦 史圣甲 杨帆 陈晓燕 杨安钢 张剑宁 温伟红 

作者机构：第四军医大学西京医院神经外科陕西西安710032 第四军医大学基础部免疫学教研室陕西西安710032 海军总医院神经外科北京100037 

基　　金：国家自然科学基金(81171924) 

出 版 物：《细胞与分子免疫学杂志》 (Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology)

年 卷 期：2013年第29卷第3期

页      码：242-245页

摘      要：目的设计针对B7-H1的shRNA序列,构建慢病毒表达载体,包装成病毒颗粒后检测其对U251细胞中B7-H1基因的沉默效果。方法设计3对针对B7-H1 mRNA的shRNA,化学合成正义链和反义链,退火后与酶切后的pLKO.1载体进行连接。测序正确后包装成病毒并感染U251细胞,分别用qRT-PCR及Western blot法检测干扰效果。结果 qRT-PCR及Westernblot结果证实设计的3条RNA干扰序列中有2条可有效沉默U251细胞中B7-H1的表达。结论所制备的针对B7-H1的shR-NA慢病毒能特异性沉默B7-H1。

主 题 词：B7-H1 shRNA 慢病毒载体 U251MG细胞 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13423/j.cnki.cjcmi.006730

馆 藏 号：203565634...