新型鸭呼肠孤病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

作     者：袁远华 吴志新 王俊峰 黄兴国 贺东生 黄淑坚 YUAN Yuan-hua;WU Zhi-xin;WANG Jun-feng;HUANG Xing-guo;HE Dong-sheng;HUANG Shu-jian

作者机构：华南农业大学兽医学院广东广州510642 佛山科学技术学院生命科学学院广东佛山528231 三水区乐平镇动物防疫检疫站广东佛山528137 韶关市动物卫生监督所广东韶关512026 

基　　金：广东省科技计划项目(2012A020100001) 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2013年第35卷第9期

页      码：738-741页

摘      要：为建立一种快速检测新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)的方法,本研究参考GenBank中登录的NDRV S3基因保守序列设计特异性引物,建立了一种检测NDRV的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR方法,对其特异性、敏感性和重复性进行检验,并与普通PCR进行比较。结果显示,扩增标准曲线相关系数为0.9996,扩增产物的熔解曲线仅出现单特异峰。对番鸭呼肠孤病毒、禽呼肠孤病毒、鸭病毒性肝炎病毒、鸭瘟病毒、鸭新城疫病毒和禽流感病毒均未检测到荧光信号。对NDRV的最小检出量为29拷贝/μL,比普通PCR敏感性高100倍。组内和组间变异系数均小于2%,重复性好。该检测方法的建立为NDRV早期快速检测及定量分析提供新的方法。

主 题 词：新型鸭呼肠孤病毒 SYBR GreenⅠ 实时荧光定量RT-PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-0589.2013.09.12

馆 藏 号：203565857...