多用途树种无患子ISSR-PCR体系建立与检测

作     者：刁松锋 邵文豪 姜景民 栾启福 DIAO Song-Feng;SHAO Wen-Hao;JIANG Jing-Min;LUAN Qi-Fu

作者机构：中国林业科学研究院亚热带林业研究所浙江富阳311400 中国林业科学研究院经济林研究中心郑州450003 

基　　金：国家林业公益性科研专项(201404104 200804032) 浙江省重大科技专项重点农业项目(2011C12015) 

出 版 物：《广西植物》 (Guihaia)

年 卷 期：2015年第35卷第6期

页      码：899-904页

摘      要：无患子(Sapindus mukorossi)是我国长江以南地区传统的重要绿化树种,其果皮富含皂苷,种仁富含油脂,为新型木本油料树种之一。为了获得基于KOD FX高保真DNA聚合酶试剂盒的无患子ISSR-PCR的最佳反应体系,该文采用正交优化设计相结合的方法,研究了引物浓度、d NTPs浓度、KOD FX酶、模板DNA浓度和Mg2+浓度对无患子ISSR-PCR反应体系的影响,并在此基础上对退火温度进一步优化,最终确立了适合无患子的ISSR-PCR反应的最佳体系和程序,即20μL PCR反应体系中,引物0.5μmol·L-1、d NTPs 0.05 mmol·L-1、KOD FX酶0.06 U·μL-1、模板DNA浓度1.0 ng·μL-1和Mg2+1.0 mmol·L-1。当以UBC841为引物时,PCR扩增程序为94℃预变性2 min,98℃变性10 s,48.6℃退火30 s,68℃延伸90 s,35个循环,68℃延伸7 min,4℃保存。这一优化的ISSR-PCR反应体系的建立,为无患子种质资源的遗传多样性、亲缘关系及遗传结构研究、种质创新与分子辅助育种等奠定了良好的基础。

主 题 词：无患子 ISSR PCR反应体系 正交设计 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 090701[090701] 0907[农学-草药学] 07[理学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 

D　O　I：10.11931/guihaia.gxzw201405042

馆 藏 号：203566958...