应用重组酶介导核酸扩增技术快速鉴定新菠萝灰粉蚧

作     者：唐慧骥 党志浩 郭长宁 王晓晶 苗小星 郭保生 徐超 Tang Huiji;Dang Zhihao;Guo Changning;Wang Xiaojing;Miao Xiaoxing;Guo Baosheng;Xu Chao

作者机构：郑州海关河南郑州450008 焦作市月季公园 

基　　金：原国家质检总局科技计划项目(2017IK013 2016IK114) 

出 版 物：《植物检疫》 (Plant Quarantine)

年 卷 期：2019年第33卷第2期

页      码：37-42页

摘      要：本文建立了基于重组酶介导核酸扩增(RAA)技术快速鉴定新菠萝灰粉蚧(Dysmicoccus neobrevipes)反应体系,并利用该技术开展了口岸截获粉蚧的检测与鉴定。通过分析河南口岸常截获的17种粉蚧线粒体COI基因序列,设计筛选了基于RAA技术的新菠萝灰粉蚧的特异性引物,并对其进行条件优化。结果表明线粒体COI基因能准确区分新菠萝灰粉蚧与其他16种粉蚧;新菠萝灰粉蚧RAA特异性引物能稳定扩增出片段大小为323 bp单一条带,最适宜扩增温度为恒温39℃,扩增时间为20～30 min,检测DNA浓度限值为1.6×10^(-3)μg/mL。本文利用RAA技术建立的新菠萝灰粉蚧快速鉴定方法,耗时短,灵敏度高,重复性好,适用于一线口岸初筛鉴定。

主 题 词：新菠萝灰粉蚧 重组酶介导核酸扩增 COI基因 鉴定 

学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 

D　O　I：10.19662/j.cnki.issn1005-2755.2019.02.009

馆 藏 号：203572629...