犬小孢子菌分离鉴定和胞外酶活性分析及基于ITS序列快速检测

作     者：寿晓岚 朱永泽 胡庆丰 吕火烊 周永列 葛玉梅 SHOU Xiao-lan;ZHU Yong-ze;HU Qing-feng;LV Huo-yang;ZHOU Yong-lie;GE Yu-mei

作者机构：德清县人民医院检验科浙江德清313299 浙江省人民医院临床医学检验中心杭州医学院附属人民医院浙江杭州310014 

基　　金：浙江省医药卫生科技项目(2017KY004) 国家卫生和计划生育委员会科研基金(WKJ-ZJ-1604) 湖州市科技计划项目(2017GY55) 

出 版 物：《中国卫生检验杂志》 (Chinese Journal of Health Laboratory Technology)

年 卷 期：2019年第29卷第3期

页      码：269-271,274页

摘      要：目的通过分离纯化、培养特性分析和表型特征鉴定来确定头癣患者病原体犬小孢子菌,检测与分析该菌株胞外酶活性和致病功能,通过基因扩增和序列测定,建立了基于ITS序列PCR快速诊断技术。方法采用PDA培养基划线培养,根据真菌学检查确诊犬小孢子菌感染,采用API-ZYM酶活检测系统对该犬小孢子菌临床株分别进行19种胞外酶活性检测;设计真菌5.8S rDNA和28S rDNA基因间隔序列特异性引物扩增并测序后,运用GenBank的BLAST软件搜索比对,从分子水平确诊犬小孢子菌感染。结果头部皮肤真菌镜检阳性,经培养鉴定为犬小孢子菌;19种胞外酶检测结果显示,12种胞外酶具有活性(其中脂酶2种、肽酶3种、水解酶2种、糖发酵酶5种);该菌株扩增的ITS序列基因片段大小为737 bp,比对结果显示为犬小孢子菌特异性序列。结论犬小孢子菌可导致头癣病,其临床症状及致病机制可能与其所分泌的12种胞外酶活性有关,结合培养特性和临床表现,通过PCR快速诊断技术,能够快速准确地鉴别出犬小孢子菌感染。

主 题 词：犬小孢子菌 胞外酶 ITS序列 快速诊断 

学科分类：1010[医学-医学技术类] 10[医学] 

馆 藏 号：203572684...