重组环状胸腺五肽结构类似物Cyclo-(Cys-Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-)的制备、鉴定和活性检测

作     者：余榕捷 高媛 林剑 谢秋玲 谭毅力 洪岸 周天鸿 YU Rong-Jie;GAO Yuan;LIN Jian;XIE Qiu-Ling;TAM Ngai-lik;HONG An;ZHOU Tian-Hong

作者机构：暨南大学生物工程研究所 河北医科大学生物化学与分子生物学教研室石家庄050017 暨南大学生命科学与技术学院 

基　　金：国家"十五"重大专项(No.2002AA2Z3344) 广东省自然科学基金重点项目(No.021202) 广东省科技攻关项目(No.2004A10902002) 

出 版 物：《中国生物化学与分子生物学报》 (Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology)

年 卷 期：2006年第22卷第8期

页      码：652-658页

摘      要：为了实现蛋白内含肽(Intein)介导的重组环状胸腺五肽结构类似物[cyclo-(Cys-Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-),cTP]的高效制备,设计并合成编码6个氨基酸的cTP基因,克隆到表达载体pTWIN1,重组表达质粒pTW-cTp转化***2566构建工程菌,IPTG诱导由几丁质结合域纯化标签(chitinbindingdomain,CBD)、2个蛋白内含肽和目的多肽组成的“多元”融合蛋白(CBD-intein1-cTP-intein2-CBD)的高效表达.几丁质柱亲合层析纯化融合蛋白后,改变pH值和温度诱导intein1C端切割,硫醇MESNA诱导intein2N端切割,释放N端为Cys,C端为硫酯的重组cTP线性前体,通过非保护多肽硫酯环合法实现环肽生成.激光飞行质谱结果显示,纯化产物的分子量为764·4,与环肽的理论值相符.免疫活性检测结果显示,环肽cTP较线性多肽TP-5具有更显著的促进巨噬细胞吞噬能力的活性(P<0·01)和促进B细胞抗体生成的活性(P<0·01).

主 题 词：重组环肽 蛋白内含肽 非保护多肽硫酯环合 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1007-7626.2006.08.010

馆 藏 号：203572787...