正交设计优化日本落叶松SRAP-PCR反应体系

作     者：汪成成 崔文山 董健 冯健 王骞春 姜韬 闫文文 张璐 WANG Cheng-cheng;CUI Wen-shan;DONG Jian;FENG Jian;WANG Qian-chun;JIANG Tao;YAN Wen-wen;ZHANG Lu

作者机构：沈阳农业大学林学院沈阳110866 辽宁省林业科学研究院沈阳110032 

基　　金："十一五"国家科技支撑计划项目(2006BAD01A1401) 辽宁省科技厅攻关项目(2008207001) 

出 版 物：《沈阳农业大学学报》 (Journal of Shenyang Agricultural University)

年 卷 期：2010年第41卷第4期

页      码：444-448页

摘      要：利用正交设计L16(45)对日本落叶松SRAP-PCR反应体系的模板DNA、Mg2+、dNTPs、引物、Taq酶浓度五因素在四个水平上进行优化试验,PCR结果采用统计软件SPSS13.0进行分析,结果表明:各因素的不同水平对PCR反应结果都有显著的影响,其中模板DNA影响最大;筛选得到日本落叶松SRAP-PCR反应的最佳体系(20μL)为模板DNA浓度为120ng.20μL-1,dNTPs的浓度为0.15mmol·L-1,引物浓度为0.3μmol·L-1,Mg2+浓度为1.5mmol·L-1,Taq酶浓度为0.5U.20μL-1。这一优化体系的建立为今后利用SRAP标记技术对日本落叶松遗传多样性的研究奠定基础。

主 题 词：正交设计 SRAP-PCR 日本落叶松 

学科分类：0907[农学-草药学] 08[工学] 0829[工学-安全科学与工程类] 09[农学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-1700.2010.04.012

馆 藏 号：203572863...