MBP和MEHP联合染毒致小鼠睾丸间质细胞的凋亡作用及其可能机制

作     者：李玲 员朋娟 德小明 李丽萍 张亚娟 李娅辉 伊梦楠 张鹏举 刘贺荣 LI Ling;YUN Peng-juan;DE Xiao-ming;LI Li-ping;ZHANG Ya-juan;LI Ya-hui;YI Meng-nan;ZHANG Peng-jü;LIU He-rong

作者机构：宁夏医科大学公共卫生与管理学院劳动卫生与环境卫生系生育力保持教育部重点实验室宁夏回族自治区生殖与遗传重点实验室 

基　　金：宁夏自然基金项目(2018AAC03070) 

出 版 物：《环境与职业医学》 (Journal of Environmental and Occupational Medicine)

年 卷 期：2019年第36卷第2期

页      码：175-180页

摘      要：[目的]探讨邻苯二甲酸单丁酯(MBP)和邻苯二甲酸单乙基己酯(MEHP)染毒致小鼠睾丸间质细胞的凋亡作用及葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、活化转录因子4(ATF4)与C/EBP同源蛋白(CHOP)参与的可能机制。[方法]培养小鼠睾丸间质细胞(TM-3细胞)并且测出细胞生长曲线;用CCK-8法检测细胞在染毒浓度400μmol/L状况下的细胞活性变化;用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡情况;应用免疫印迹法检测GRP78、ATF4和CHOP含量的变化。单因素方差分析法分析染毒组与对照组之间的关系,2×2析因设计法判断联合染毒的交互作用,当(|MBP+MEHP组指标-对照组指标)|<(|MBP组指标-对照组指标)|+(|MEHP组指标-对照组指标)|,可判定交互作用类型为拮抗作用。[结果]细胞在24～60 h时间段内处于对数生长期,且细胞正常状态下的凋亡数量比较稳定。细胞活性检测结果显示MEHP染毒对细胞的抑制率比MBP的大,并且MBP+MEHP联合染毒且具有交互作用,其作用方式为拮抗作用[24 h:(|53.21±7.68)%|<(|42.99±8.23)%|+(|65.46±8.29)%)|;36 h:(|79.87±3.76)%|<(|53.12±4.33)%|+(|74.80±4.96)%|;48 h:(|85.97±6.07)%|<(|38.98±9.59)%|+(|80.73±4.99)%|],具有统计学意义(P <0.05);细胞凋亡比例也呈现出MEHP组[早期凋亡:(17.44±0.82)%,总凋亡:(44.24±0.89)%]大于MBP染毒组[早期凋亡:(14.58±0.97)%,总凋亡:(29.46±0.58)%],同时出现MEHP+MBP联合染毒组[早期凋亡:(8.58±0.35)%,总凋亡:(32.28±0.41)%]的凋亡比例小于各单独染毒组之和,呈现出拮抗作用;ATF4和GRP78在MEHP染毒组的表达量高于MBP染毒组,MEHP+MBP联合染毒组表达量低于MEHP染毒组但高于MBP染毒组,并且表现出拮抗作用。CHOP的表达量与对照组相比也有变化,MEHP染毒组表达量较MBP染毒组表达量高,在MEHP+MBP联合染毒组表达量低于单独染毒组,并且表现出拮抗作用,但MBP染毒组没有主效应。[结论] MBP、MEHP染毒致TM-3细胞凋亡具有主效应,MBP和MEHP联合染毒致TM-3细胞凋亡具有交互作用,呈现拮抗作用。GRP78-ATF4-CHOP通路可能参与MBP、MEHP染毒致TM-3细胞的凋亡过程。

主 题 词：邻苯二甲酸单酯 睾丸间质细胞 凋亡 联合染毒 GRP78-ATF4-CHOP 

学科分类：100405[100405] 1004[医学-公共卫生预防医学类] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13213/j.cnki.jeom.2019.18553

馆 藏 号：203573221...