siRNAs表达载体沉默RAB5A基因的位置效应研究

作     者：陈香梅 李蒙 刘珊珊 李钰 CHEN Xiang-mei;LI Meng;LIU Shan-shan;LI Yu

作者机构：哈尔滨医科大学医学遗传学研究室150081 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(39970396) 黑龙江省攻关项目留学回国基金资助(LC04C02) 黑龙江省教育厅海外学人科研(合作)项目资助(1054HZ013) 

出 版 物：《中国地方病学杂志》 (Chinese Jouranl of Endemiology)

年 卷 期：2006年第25卷第6期

页      码：699-702页

摘      要：目的研究小干扰RNA(siRNAs)表达载体沉默RAB5A基因的位置效应,寻找沉默RAB5A基因的最佳作用靶点。方法利用MFold软件分析RAB5A mRNA的二级结构,构建针对RAB5A mRNA不同位点的siRNAs表达载体,转染Anip973细胞后,通过RT-PCR和Western-blot方法评价siRNAs对RAB5A基因表达的抑制作用。结果针对RAB5A mRNA编码区内最可及位点设计的siRNAs分别抑制72％和85％的RAB5A基因表达,而针对最不可及位点设计的siRNAs则完全没有活性;非编码区内也存在沉默RAB5A基因的siRNAs有效作用靶点;siRNAs分子与RAB5A mRNA靶序列之间引入2个错配碱基时,siRNAs的抑制活性完全丧失。结论MFold软件分析的RAB5A mRNA二级结构可以作为分析和寻找可及位点的依据,siRNAs的作用效率与RAB5A mRNA靶位点的可及性密切相关。

主 题 词：RAB5A基因 小干扰RNA 位置效应 可及位点 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1000-4955.2006.06.037

馆 藏 号：203573575...