淡水小龙虾主要过敏原原肌球蛋白基因的克隆、表达及其免疫活性鉴定

作     者：黄素文 杨文潮 朱海 王建峰 倪健波 吕志平 冼静雯 刘志刚 HUANG Su-Wen;YANG Wen-Chao;ZHU Hai;WANG Jian-Feng;NI Jian-Bo;L(U Zhi-Ping;XIAN Jing-Wen;LIU Zhi-Gang

作者机构：宁波出入境检验检疫局宁波315012 深圳出入境检验检疫局深圳518067 深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所深圳518060 

基　　金：国家质检总局资助项目(2009IK173) 

出 版 物：《中国免疫学杂志》 (Chinese Journal of Immunology)

年 卷 期：2011年第27卷第7期

页      码：642-647页

摘      要：目的:克隆、表达淡水小龙虾肌肉中主要过敏原原肌球蛋白(tropomyosin),并对其免疫活性进行鉴定。方法:根据甲壳类的泛过敏原tropomyosin基因的高度保守性设计简并引物,通过RT-PCR克隆出淡水小龙虾虾肉中过敏原tropomyosin的全长基因。将该基因与pET-28a载体连接并转化大肠杆菌Rosetta(DE3),经诱导异丙基-B-D-硫代乳糖苷(IPTG)诱导表达,Ni2+亲和层析柱纯化后,用Western blot检测该重组蛋白的免疫活性。结果:序列分析显示该基因包括一个编码284个氨基酸的开放阅读框,与已知虾、蟹、龙虾等的过敏原tropomyosin基因有较高同源性(>80%)。根据过敏原的命名规则,将其命名为Proc 1,并提交GenBank数据库,登录号为FJ769183。重组小龙虾tropomyosin在大肠杆菌中能高效的表达,Western blot检测结果显示该重组蛋白具有良好的免疫活性。结论:研究成功表达了具有免疫活性的淡水小龙虾原肌球蛋白,为虾过敏性疾病的诊断和治疗奠定了基础。

主 题 词：淡水小龙虾 过敏原 原肌球蛋白 免疫活性 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-484X.2011.07.015

馆 藏 号：203573813...