猪带绦虫六钩蚴45W-4BX的高效表达、纯化及活性分析

作     者：骆学农 郑亚东 吴旭刚 窦永喜 景志忠 才学鹏 LUO Xue-nong;ZHENG Ya-dong;WU Xu-gang;DOU Yong-xi;JING Zhi-zhong;CAI Xue-peng

作者机构：中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃兰州730046 贵州省兽药检察所贵州贵阳550006 

基　　金：国家重大基础研究发展规划"973"计划资助项目(G1999011906) 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2006年第26卷第1期

页      码：47-50页

摘      要：截去猪带绦虫六钩蚴45W-4B基因的N端信号肽和C端17个疏水氨基酸序列形成45W-4BX。设计特异性表达引物,PCR扩增目的片段,经BamH和EcoR酶切后与表达载体pGEX-4T-1连接转化BL21感受态细胞。用酶切及PCR扩增鉴定阳性克隆,测序证明阅读框是否正确。用IPTG诱导表达,产物进行SDS-PAGE电泳,Western blot分析其活性。包涵体经纯化、透析复性后作为包被抗原检测囊虫猪和囊虫病人血清中的4B抗体。结果表明,截断的4BX(351bp)基因在大肠杆菌中获得高效表达,表达产物为相对分子质量40000的融合蛋白,并能被囊虫病人血清所识别。ELISA检测表明,囊虫病人血清中含有高滴度的4B抗体,所以45W-4BX的表达产物有可能作为候选抗原用于囊虫病的诊断和免疫预防。

主 题 词：猪带绦虫六钩蚴 45W-4BX基因 表达 活性分析 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 090601[090601] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-水产类] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-4545.2006.01.015

馆 藏 号：203573865...